時間:2021年12月18日 分類:農業論文 次數:
摘要:虎杖中含有二苯乙烯類、蒽醌類、黃酮類、鞣質和多糖等多種生物活性成分,在動物養殖中具有提高動物的生產性能和機體免疫力,改善動物的抗菌、抗病毒等生物學功能。文章對虎杖活性成分的生物學功能及其在動物養殖中的應用進行論述,旨在為虎杖的進一步開發利用提供參考。
關鍵詞:虎杖;活性成分;生物學功能;動物養殖
中藥虎杖來自蓼科植物虎杖(PolygonumcuspidatumSieb.etZucc.)的干燥根莖和根。虎杖及其提取物應用于動物養殖能夠提高動物的生長性能和機體免疫力,發揮抗菌、抗病毒作用,降低動物的發病率。本文對虎杖活性成分的生物學功能及其在動物養殖中的應用進行綜述,為開發虎杖資源提供參考。
1虎杖的活性成分
虎杖中含有二苯乙烯類、蒽醌類、黃酮類、鞣質和多糖等多種成分,其中二苯乙烯類的活性成分包括白藜蘆醇(resveratrol)、虎杖苷(polydatin)等;蒽醌類的活性成分包括大黃素(emodin)、大黃酸(rheun)、大黃素-6-甲醚(physcion)、大黃素-8-單甲醚(questin)等;黃酮類的活性成分包括虎杖素(reynoutrin)、槲皮素(quercetin)、木犀草素-7-葡萄糖苷(luteolin-7-glucoside)等[1-4]。其中,白藜蘆醇、虎杖苷、大黃素是虎杖的重要活性成分。
2虎杖活性成分的生物學功能
2.1白藜蘆醇
白藜蘆醇(resveratrol,簡稱Res),又稱芪三酚,是虎杖生物活性的重要物質基礎,具有抗菌、抗氧化、抗炎、保護心血管系統、抗病毒等生物活性[5-11]。胡瑤蓮等[12]研究發現,日糧中添加600mg/kg的Res可顯著提高育肥豬血清中過氧化氫酶(CAT)活性以及總抗氧化能力(T-AOC);張浩等[13]研究發現,飼喂添加600mg/kgRes的日糧可顯著提高低出生重仔豬血清和肝臟中CAT活性以及肝臟ATP含量,上調肝臟NRF1的mRNA表達量。兩者均表明Res具有較強的抗氧化活性。
王永生等[14]有關Res對脂多糖(LPS)誘導牛乳腺上皮細胞(bMEC)的抗炎作用及機制的研究發現,Res不影響bMEC細胞活力,但可降低LPS刺激的bMEC中TNF-α、IL-6和IL-1β含量,抑制IKKβ活性,抑制IκBα和NF-κB的酸化,說明Res可通過調控NF-κB信號通路抑制bMEC炎性因子的分泌,達到抗炎作用。Li等[15]研究表明,Res對體內血管功能和血壓的保護作用機制為上調內皮NO合酶(eNOS)的表達,刺激eNOS酶活性和防止eNOS解偶聯,增加內皮細胞一氧化氮(NO)的產生。Res還具有抑制內皮素-1合成,緩解內皮細胞和平滑肌細胞的氧化應激,改善病理刺激誘導的平滑肌細胞增殖、血管重塑和動脈僵硬,調節免疫細胞功能,抑制免疫細胞向血管壁浸潤,改善血管周圍脂肪組織等功能。
2.2虎杖苷
虎杖苷(polydatin)是虎杖重要活性成分之一,具有抗腫瘤、抗病毒、抗氧化、抗菌、抗動脈粥樣硬化、保肝、抗糖尿病等生物活性[16-21]。閆恩法等[22]研究發現,日糧中添加虎杖苷能夠顯著提高大鼠腎臟GSH-Px酶活性,降低血清肌酐(Cr)及尿素氮(BUN)含量;熒光定量PCR結果顯示,虎杖苷能夠顯著提高大鼠腎臟Nrf2基因及其下游調控基因GCLC、SOD1、GPx1和GCLM的表達量,表明虎杖苷可通過激活熱應激模型中Keap1-Nrf2-ARE信號通路,調控其下游基因表達,進而改變抗氧化酶系統而發揮抗氧化的作用。
吉秋霞等[23]研究發現,虎杖苷能夠顯著改善高脂喂養的中年LDLr-/-小鼠代謝基礎特征,抑制肝臟脂肪變性和肝纖維化,顯著降低肝臟組織中TC、TG、TNF-α、IL-6、MDA和HYP水平,顯著升高SOD、GSH和CAT活性。表明虎杖苷對高脂喂養的中年LDLr-/-小鼠非酒精性脂肪肝炎具有保護作用。Jiang等[24]研究結果表明,虎杖苷在金黃色葡萄球菌誘導的乳腺炎中發揮抗炎作用,其作用機制是通過抑制TLR2介導的p38MAPK/NF-κB信號通路的激活,下調促炎因子水平。
2.3大黃素
大黃素(emodin)是虎杖蒽醌類化合物的代表成分,具有較強的生物活性,包括抗癌、抗菌、抗炎、抗氧化、抗糖尿病、瀉下、抗潰瘍等[7,25-27]。張麗恒等[28]研究大黃素對大腸桿菌的體外抗菌活性及機制發現,大黃素具有明顯的抗大腸桿菌作用,其最小抑菌濃度(MIC)為64μg/mL;MIC、0.5MIC大黃素與大腸桿菌菌液作用1~8h,可使大腸桿菌菌液電導率、大分子物質含量、鈣離子濃度、總漏出率和堿性磷酸酶活力極顯著升高,表明大黃素通過增加大腸桿菌細胞膜和細胞壁的通透性,使大腸桿菌菌體內的物質大量外泄,達到體外抗菌的作用。
曹麗萍等[29]在基礎餌料中加入濃度為6μg/mL的大黃素,發現其對建鯉具有較強的清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基的能力,清除率達到81%;餌料中加入3、5g/kg大黃素能夠顯著提高建鯉的相對增重率和特定生長率,降低餌料系數,穩定肝細胞膜,顯著抑制谷丙轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST)及乳酸脫氫酶(LDH)溶出,顯著恢復血清中血蛋白和總蛋白含量,抑制丙二醛(MDA)生成。大黃素的保肝作用,與其抗氧化、清除自由基的能力以及抑制CCL4對CYP450酶的誘導作用有關。
3虎杖在動物養殖中的應用
3.1虎杖在家禽養殖中的應用
虎杖可治療雞呼吸道疾病,提高雞免疫力,降低發病率,對多種雞源性病菌、病毒均具有抑制作用。鄺哲師等[30]研究發現,在基礎日糧中添加不同比例的虎杖渣粉飼喂山地雞3w,山地雞胸腺指數、脾臟指數、法氏囊指數均較空白組顯著增加,但血液生化指標的變化不顯著,說明飼喂虎杖渣粉可提高山地雞的免疫力,降低發病率。陳圣威等[31]比較采用兩種提取方法的虎杖等9種中草藥對雞源變形桿菌的抑菌效果,結果發現,虎杖的水提液及醇提液均對雞源變形桿菌具有抑菌效果,其MIC值均為125mg/mL。代如意等[32]探討虎杖等5種中藥對雞白痢沙門氏菌的抑菌效果,結果顯示,虎杖提取物對雞白痢沙門氏菌具有較強的抑菌效果,MIC、最低殺菌濃度(MBC)值均為15.60mg/mL。
王學理等[33]采用雞胚培養法和血凝試驗測定中藥虎杖醇提取液對雞新城疫病毒的作用,結果顯示,接種病毒+虎杖醇提液組與接種病毒+生理鹽水組的差異極顯著,接種病毒+虎杖醇提取液組與接種病毒+鹽酸金剛烷胺組的差異顯著,表明虎杖醇提液與病毒同時接種雞胚,可完全抑制雞新城疫病毒在雞胚中的增殖。趙增成等[34]采用雞胚培養法和血凝試驗也證明虎杖水提取液具有抗雞新城疫病毒的作用。
3.2虎杖在豬養殖中的應用
虎杖及其提取物能夠提高豬生長性能和免疫力,降低豬的腹瀉率,維持豬腸道健康,對多種豬源性病菌、病毒均具有抑制作用,有關虎杖應用于豬營養、養殖的研究較多[35-39]。徐瑞等[40]研究發現,基礎日糧中添加80g/t虎杖后,保育豬的平均日增重提高8.35%,平均日 采食量提高9.43%,料重比降低0.60%,腹瀉率有所降低,血液中白細胞、紅細胞數量較低,表明虎杖可提高保育豬的生長性能,降低腹瀉率,提高免疫力。
易宗容等[41]在斷奶豬基礎日糧中添加1000mg/kg的虎杖活性成分Res,發現Res能夠顯著提高斷奶仔豬空腸中CAT和SOD的活性、空腸Claudin-1和ZO-2mRNA的表達量、空腸絨毛的高度和絨隱比以及仔豬的ADFI和ADG,表明白藜蘆醇能夠顯著提高斷奶仔豬腸道的抗氧化酶活性,促進腸道屏障基因表達,同時能夠改善仔豬的腸道形態,提高仔豬的生長性能。劉云等[42]在比較虎杖等6種中藥水煎煮液體外抗豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)的作用中發現:在體外抗PRRSV作用試驗中,虎杖水煎煮液組細胞形態未出現明顯的細胞病變;虎杖水煎煮液組對PRRSV的阻斷、抑制、直接滅活作用最高抑制率分別為110.4%、94.3%、130.8%,表明虎杖水提取物具有良好的抗PRRSV效果,可應用于PRRSV的臨床治療。
陳希文等[43]觀察比較虎杖等22種中藥多糖提取物對豬源金黃色葡萄糖球菌的體外抑菌活性,結果發現虎杖多糖提取物具有較強的抑菌效果,其MIC、MBC值均為7.8g/mL。Li等[44]研究虎杖的大黃素提取物對副豬嗜血桿菌(HPS)抑菌活性,體外抑菌試驗表明虎杖大黃素對HPS表現出較強的抑制作用,MIC、MBC值分別為32、64μg/mL,且抑菌活性隨藥物濃度增加而增強。流式細胞儀檢測表明虎杖大黃素可能是通過破壞HPS細胞膜完整性,增加細胞膜通透性發揮其抑菌效果;采用透射電子顯微鏡觀察,發現64μg/mL的虎杖大黃素可導致HPS細胞形態不規則,質壁分離,細胞膜、細胞壁破裂,細胞質空泡化。
3.3虎杖在水產養殖中的應用
Zhou等[45]研究虎杖提取物大黃素抗多子小瓜蟲的作用,體外試驗結果顯示,1mg/L的大黃素能在96min內完全殺滅該寄生蟲;0.5mg/L甚至更低濃度大黃素預處理2h,可顯著降低幼蟲的侵染率;1、2mg/L濃度大黃素可分別終止未包囊和包囊階段多子小瓜蟲的繁殖;體內試驗結果顯示,0.5mg/L的虎杖大黃素對感染及未感染多子小瓜蟲草魚均具有一定的保護作用。
以上結果表明,虎杖大黃素具有較好的殺滅多子小瓜蟲的作用,且毒性較小。范耘碩等[46]在血鸚鵡高脂飼料中添加虎杖,結果發現,2.0%虎杖作為血鸚鵡高脂飼料添加劑連續投喂7d后可顯著增強血鸚鵡肝臟SOD、CAT及溶菌酶(LZM)活性,改善鸚鵡的非特異性免疫能力,緩解并減輕其肝細胞的損傷,降低肝臟的脂質過氧化程度,提高脂類代謝的能力,且在第14d時效果最穩定。馬良驍等[47]研究虎杖提取物對尼羅羅非魚脂肪肝的干預作用,結果發現,虎杖提取物組(5g/kg虎杖提取物+高脂飼料)能夠明顯抑制飼喂高脂飼料所引起的血清血脂水平、ALT活性升高,以及肝組織SOD活性、T-AOC和GSH含量降低,并能夠顯著降低其肝組織中MDA和肝脂肪的含量;基因表達測定結果表明,虎杖提取物組能夠顯著抑制飼喂高脂飼料引起白細胞介素-1β(IL-1β)上調及過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)下調。
由此可見,虎杖提取物對于高脂飼料引起的尼羅羅非魚脂肪性肝損傷具有一定的治療作用。程敏等[48]研究結果表明,2.0mg/mL虎杖醇提取物能夠極顯著提高白細胞氧呼吸爆發活性,呼吸爆發增加率為78.93%;0.5mg/mL虎杖醇提物能夠提高尼羅羅非魚的白細胞吞噬活性,吞噬率增加了64.93%;虎杖分別與白頭翁、柯子、五倍子聯用時均對白細胞吞噬活性呈協同作用,吞噬聯用指數分別為11.45、6.20、3.03,表明虎杖醇提取物能提高尼羅羅非魚血漿白細胞免疫活性。
李秋云等[49]研究認為,虎杖對5株致病菌均具有較好的抑菌效果,MIC值均為0.75mg/mL。吳夢曉等[50]認為,150mg/mL的虎杖水提液對無乳鏈球菌的抑菌直徑為0~6.27mm,表明虎杖具有良好的抗羅非魚鏈球菌的活性的作用。石瑤瑤等[51]通過過氧化氫誘導草魚原代肝細胞,構建體外氧化損傷模型,并評價虎杖等8種中藥抗氧化能力,結果顯示,虎杖具有較強的清除DPPH自由基及氧化損傷修復能力。
4結論
虎杖及其提取物作為飼料添加劑應用于動物養殖,能夠改善動物的生長性能,增強機體免疫力,發揮抗菌抗病毒作用,降低動物的發病率,且虎杖具有無公害、無副作用、用途廣泛的優勢,在動物養殖中具有廣闊的應用前景。但如何充分利用虎杖資源,使其能夠同時滿足藥用與獸用的需求等問題仍待解決。此外,虎杖在動物養殖中的具體應用研究仍然相對較少,在動物上的作用機理研究不夠深入,在不同生長階段、不同動物中的用法用量也有待進一步明確。
參考文獻
[1]張云婷,黃曉,陳運中,等.虎杖主要化學成分及其生物合成機制研究進展[J].中國中藥雜志,2020,45(18):4364-4372.
[2]左衛平,蔡昱,劉文英,等.虎杖化學成分研究[J].中國藥學雜志,2020,55(3):189-193.
[3]SunYS,GuSB,GuoLL,etal.PreparativeseparationoffiveflavonesfromflowersofPolygonumcuspidatumbyhigh-speedcountercurrentchromatography[J].JournalofSeparationScience,2014,37(13):1703-1709.
[4]DongLP,GuoWJ,ZhouLL,etal.ChemicalconstituentsofPolygonumcuspidatum[J].ChemistryofNaturalCompounds,2017,53(2):368-370.
[5]LinHW,SunMX,WangLM,etal.Anti-HIVactivitiesofthecompoundsisolatedfromPolygonumcuspidatumandPolygonummultiflorum[J].PlantaMedica,2010,76(9):889-892.
[6]HanX,ZhaoN,ZhuWW,etal.ResveratrolattenuatesTNBClungmetastasisbydown-regulatingPD-1expressiononpulmonaryTcellsandconvertingmacrophagestoM1phenotypeinamurinetumormodel[J].CellularImmunology,2021,368:104423.
作者:徐蘭程阮慧妮黃晨帆傅春青梁英莉蒙琴辛桂瑜*