[摘要]目的：研究沙參麥冬顆粒中正丁醇部位的化學成分。方法：利用溶劑萃取法、大孔樹脂柱層析法、硅膠柱層析法、半制備高效液相色譜法等多種分離手段進行分離純化，并結合理化性質、核磁、質譜等數據進行結構鑒定。結果：從該復方的正丁醇部位分離出10個化合物，分別鑒定為：環(丙氨酸-脯氨酸)(1)，間苯二酚(2)，對羥基苯乙醇(3)，腺嘌呤(4)，2’-脫氧腺苷(5)，腺苷(6)，次黃嘌呤(7)，icarisideB1(8)，酪氨酸(9)，L-色氨酸(10)。結論：其中化合物(1)、(2)、(4)、(5)、(7)未在復方單味藥材中被發現，均為首次從該復方藥材中分離得到。

　　[關鍵詞]沙參麥冬顆粒;正丁醇部位;化學成分

　　沙參麥冬顆粒是在經典名方沙參麥冬湯的基礎上，開發成中成藥制劑的新藥。沙參麥冬湯最早源于清代名醫吳鞠通的《溫病條辨》，為治療肺陰虛的經典名方藥，由北沙參、麥冬、玉竹、天花粉、白扁豆、甘草、桑葉七味中藥組成;沙參麥冬顆粒在此經典名方的基礎上，對方中味藥做出科學合理的調整，加入適量糊精和阿司帕坦，以90%乙醇制軟材制粒。

　　方中北沙參、麥冬為君藥，滋養潤肺、清熱生津;玉竹甘平養陰潤燥、天花粉甘寒清熱生津，共為臣藥;白扁豆、甘草益氣培中、甘緩和胃，桑葉清宣燥熱、疏達肺絡，三藥合為佐使;諸藥配伍共奏甘寒生津、清養肺胃之功效[1]。近年來，國內外對沙參麥冬湯進行了廣泛的研究，但主要集中在藥理和臨床療效上，而無關于復方化學物質基礎及其治療咳嗽的作用機制的研究。該復方的正丁醇部位提取物有較好的止咳療效，因此對正丁醇部位的化學成分進行深入的研究，為研究其治療咳嗽的作用機制奠定基礎[2]。

　　1材料

　　1.1試藥

　　北沙參、麥冬、玉竹、天花粉、白扁豆、甘草、桑葉均購于安徽敬道藥業有限公司，并嚴格按照《中國藥典》的要求鑒定藥材，均為合格藥材。

　　1.2儀器與試藥

　　高效液相色譜分析儀(日本島津公司);半制備型高效液相色譜儀(Ultimate3000，美國戴安，VWD、DAD檢測器);TU1901紫外分析儀(北京普析有限公司);全數字化超導核磁共振波譜儀(AVANCEⅢHD-500MHz，AVANCEⅢHD-600MHz，德國Bruker);QExactive四級桿-靜電場阱高分辨液質聯用儀(賽默飛世爾科技有限公司);半制備型色譜柱(SilGreenODS-C18，250mm×10mm，5μm);分析型色譜柱(SilGreenODS-C18，250mm×4.6mm，5μm);HP-20型大孔樹脂(武漢申試欣有限公司);柱色譜用硅膠(200～300目、300～400目，青島海洋化工公司);實驗所用化學試劑均購于國藥集團，均為分析純或色譜純。

　　2方法

　　2.1提取

　　34倍處方量藥材56kg，加水煎煮2次，每次10倍量水，煎煮1h，濾過，合并濾液，濾液減壓濃縮至浸膏，所得沙麥浸膏為28kg。依次用等體積的乙酸乙酯、水飽和正丁醇萃取該浸膏，得到水飽和正丁醇部位浸膏828.5g。將該部位浸膏過HP-20型大孔樹脂，分別用30%乙醇、50%乙醇、75%乙醇、100%乙醇等體積沖洗，得到30%乙醇部位浸膏211.9g。

　　取四個乙醇部位浸膏適量溶解，注入高效液相色譜儀，與乙酸乙酯部位浸膏的色譜圖對比，發現30%乙醇部位與乙酸乙酯部位的化學成分重復最少，因此選用30%乙醇部位作為研究對象。拌以等量硅膠(200～300目)，經硅膠柱色譜(200～300目)，以二氯甲烷-甲醇(9∶1→0∶10)梯度洗脫，TLC檢測后合并相同組分，共收集到10個餾分(Fr.1→Fr.10)。2.2分離Fr.1(4.0g)經硅膠柱色譜分離，二氯甲烷-甲醇(9.5∶0.5→9∶1)梯度洗脫，得到3個亞餾分(Fr.1-1～1-3);Fr.1-1(0.954g)經半制備HPLC(流動相為90%甲醇)分離純化得到化合物1(4.8mg)、2(5.6mg)、3(4.6mg)。Fr.4(27.09g)經硅膠柱色譜分離，二氯甲烷-甲醇(9∶1→7∶3)梯度洗脫，得到12個亞餾分(Fr.4-1～4-12);Fr.4～7(0.23g)經半制備HPLC(流動相為80%甲醇)分離純化得到化合物4(3.1mg)、5(5.2mg)、8(1.6mg);Fr.4～8(1.76g)經半制備HPLC(流動相為95%甲醇)分離純化得到化合物6(5.8mg)。Fr.3(18.04g)經硅膠柱色譜分離，二氯甲烷-甲醇(9∶1→8∶2)梯度洗脫，得到6個亞餾分(Fr.3-1～3-6);Fr.3～5(1.16g)經半制備HPLC(流動相為85%甲醇)分離純化得到化合物7(2.2mg)。Fr.7(4.59g)取0.5g經半制備HPLC(流動相為85%甲醇)分離純化得到化合物9(1.6mg)、10(7.4mg)。

　　3結構鑒定化合物

　　1：淡黃色粉末，可溶于甲醇，mp170～172℃。1H-NMR(500MHz，DMSO)：δ：8.13(1H，S，Ala-NH)，4.17(1H，t，J=8.0Hz，Proα)，4.09(1H，dd，J=6.71，13.38Hz，Alaα)，3.41(2H，m，Proδ)，1.78～1.94(4H，m，ProβandProγ)，1.22(3H，d，J=6.9Hz，Alaβ);13C-NMR(125MHz，DMSO)：δ：170.43(Pro-CO)，167.01(Ala-CO)，59.12(Pro-Cα)，50.62(Ala-Cα)，45.29(Pro-Cδ)，28.12(Pro-Cβ)，22.82(Pro-Cγ)，15.73(Ala-Cβ)。將以上數據與文獻[3]對照，確定該化合物為環(丙氨酸-脯氨酸)。

　　化合物2：白色粉末，易溶于乙醇，mp109～112℃。1H-NMR(500MHz，DMSO)：δ：9.08(2H，S，OH)，6.94(1H，m，H-5)，6.76(1H，d，H-2)，6.19(2H，brs，H-4，6);13C-NMR(125MHz，DMSO)：δ：158.93(C-1，3)，130.12(C-5)，106.68(C-4，6)，103.01(C-2)。將以上數據與文獻[4]對照，確定該化合物為間苯二酚。化合物3：白色粉末，易溶于甲醇，mp89～93℃。

　　1H-NMR(500MHz，DMSO)：δ：6.99(2H，d，H-2，H-6)，6.66(2H，d，H-3，H-5)，3.52(2H，t，H-2’)，2.60(2H，t，H-1’);13C-NMR(125MHz，DM-SO)：δ：155.94(C-4)，130.10(C-1)，129.42(C-2，C-6)，115.42(C-3，C-5)，63.05(C-2’)，38.72(C-1’)。將以上數據與文獻[5]對照，確定該化合物為對羥基苯乙醇。

　　化合物4：淡黃色粉末，難溶于水，mp360～365℃。ESI-MSm/z：136[M+H]+，134[M-H]-;1H-NMR(500MHz，DMSO)：δ：12.81(1H，S)為亞胺基信號，8.11(1H，S)和8.09(1H，S)為芳環上孤立的氫信號，7.05(2H，S)為與芳環相連的氨基信號;13C-NMR(125MHZ，DMSO)：δ：156.13(C-6)，152.87(C-2)，150.70(C-4)，139.48(C-8)，119.21(C-5)。將以上數據與文獻[6]對照，確定該化合物為腺嘌呤。

　　化合物5：白色粉末，可溶于水，mp187～189℃。1H-NMR(500MHz，DMSO)：δ：8.33(1H，S，H-8)，8.13(1H，S，H-2)，7.27(2H，brs，NH2)，6.34(1H，dd，H-1’α)，5.30(1H，d，3’-OH)，5.23(1H，dd，5’-OH)，4.41(1H，dd，H-3’)，3.89(1H，dd，H-4’)，3.63(1H，ddd，H-5’α)，3.53(1H’，ddd，H-5’b)，2.72(1H，ddd，H-2’β)，2.26(1H，ddd，H-2’α);13C-NMR(125MHz，DMSO)：δ：156.58(C-6)，152.84(C-2)，149.40(C-4α)，140.00(C-8)，119.76(C-5)，88.48(C-4’)，84.42(C-1’)，71.45(C-3’)，62.39(C-5’)，39.06(C-2’)。

　　將以上數據與文獻[7]對照，確定該化合物為2’-脫氧腺苷。化合物6：白色粉末，可溶于甲醇，mp234～236℃。1H-NMR(500MHz，DMSO)：δ：8.34(1H，S，H-8)，8.14(1H，S，H-2)，7.30(2H，brs，NH2)，5.88(1H，d，H-1’α)，5.43(1H，d，2’-OH)，5.17(1H，d，3’-OH)，4.61(1H，dd，H-2’β)，4.11(1H，dd，H-3’)，3.97(1H，dd，H-4’)，3.68(1H，ddd，H-5’α)，3.56(1H，ddd，H-5’b);13C-NMR(125MHz，DM-SO)：δ：156.63(C-6)，152.84(C-2)，149.55(C-4α)，140.37(C-8)，119.84(C-5)，88.44(C-1’)，86.37(C-4’)，73.95(C-2’)，71.13(C-3’)，62.15(C-5’)。將以上數據與文獻[7]對照，確定該化合物為腺苷。

　　化合物7：白色粉末，難溶于水，mp360～365℃。ESI-MSm/z：137[M+H]+，135[M-H]-;1H-NMR(500MHz，DMSO)：δ：8.09(1H，S，H-2)，7.96(1H，S，H-8);13C-NMR(125MHz，DMSO)：δ：156.67(C-4)，152.53(C-6)，152.05(C-8)，144.99(C-2)，140.91(C-5)。將以上數據與文獻[8]對照，確定該化合物為次黃嘌呤。化合物8：白色粉末，可溶于甲醇。

　　1H-NMR(600MHz，DMSO)：δ：1.98(1H，dd，J=13.0，2.5Hz，H-2α)，1.31(1H，H-2b)，4.17(1H，m，H-3)，2.26(1H，dd，J=13.0，1.9Hz，H-4α)，1.30(1H，H-4b)，5.78(1H，S，H-8)，2.12(3H，S，10-CH3)，1.07(3H，S，11-CH3)，1.32(3H，S，12-CH3)，1.29(3H，S，13-CH3)，4.25(1H，d，J=7.8Hz，GlcH-1’)，2.89(1H，m，H-2’)，3.15(1H，m，H-3)，3.05(1H，m，H-4’)，3.11(1H，m，H-5’)，3.67(1H，m，H-6’α);13C-NMR(150MHZ，DMSO)：δ：35.96(C-1)，47.36(C-2)，71.07(C-3)，46.44(C-4)，70.87(C-5)，118.98(C-6)，209.58(C-7)，100.10(C-8)，198.42(C-9)，26.60(C-10)，32.01(C-11)，29.11(C-12)，30.77(C-13)，101.73(GlcC-1’)，73.93(C-2’)，77.19(C-3’)，70.46(C-4’)，77.16(C-5’)，61.45(C-6’)。

　　將以上數據與文獻[9]對照，確定該化合物為icarisideB1�；�合物9：白色粉末，可微溶于水，mp300～305℃。1H-NMR(600MHz，DMSO)：δ：6.99(2H，d，J=8.3HZ，H-2’，H-6’)，6.66(2H，d，J=8.3Hz)，3.96(1H，q，H-2)，3.17(1H，S，Hα-3)，3.02(1H，dd，J=14.2Hz，5.3Hz，Hb-3);13C-NMR(150MHz，DMSO)：δ：174.86(C-1)，155.82(C-4’)，130.98(C-2’，C-6’)，129.93(C-1’)，115.53(C-3’，C-7’)，55.49(C-2)，35.33(C-3)。

　　將以上數據與文獻[10]對照，確定該化合物為酪氨酸�；�合物10：淡黃色色粉末，可溶于乙醇，mp285～289℃。ESI-MSm/z：205[M+H]+，203[M-H]-;1H-NMR(600MHz，DMSO)：δ：10.93(1H，S，NH)，7.60(1H，d，J=7.9Hz，H-4)，7.35(1H，d，J=8.1Hz，H-7)，7.21(1H，S，H-2)，7.07(1H，t，J=7.5Hz，H-6)，6.98(1H，t，J=7.4Hz，H-5)，3.33(2H，dd，J=15.0Hz，3.1Hz，H-9，H-8α)，2.98(1H，dd，J=15.1Hz，9.1Hz，H-8b);13C-NMR(150MHz，DMSO)：δ：124.63(C-2)，109.79(C-3)，118.90(C-4)，118.79(C-5)，121.42(C-6)，111.80(C-7)，27.50(C-8)，55.18(C-9)，170.97(C-10)，127.66(C-3α)，136.79(C-7α)。將以上數據與文獻[11]對照，確定該化合物為L-色氨酸。

　　4討論

　　本文利用現代分離技術，從沙參麥冬顆粒的正丁醇部位中分離得到了10個不同類型的化合物。分別為環二肽類成分環(丙氨酸-脯氨酸)(1);苯酚類成分間苯二酚(2);酚醇類成分對羥基苯乙醇(3);4個核苷類成分：腺嘌呤(4)、2’-脫氧腺苷(5)、腺苷(6)、次黃嘌呤(7);單環倍半萜類成分icarisideB1(8);二個氨基酸類成分：酪氨酸(9)、L-色氨酸(10)。其中化合物icarisideB1(8)為淫羊藿次苷類，多報道于淫羊藿增強免疫力、治療慢性氣管炎引起的咳嗽等相關研究中[12]�；�合物腺嘌呤(4)、2’-脫氧腺苷(5)、腺苷(6)、次黃嘌呤(7)、酪氨酸(9)、L-色氨酸(10)多報道于名貴藥材冬蟲夏草止咳生理活性和藥效的相關研究中[13]。

　　化合物對羥基苯乙醇(3)最初報道于傳統中藥材白屈菜的相關研究中，該味藥材主要用于治療慢性氣管炎、百日咳等咳嗽癥狀[14-15]。據此可初步推測，正丁醇部位提取物中的icari-sideB1、核苷類物質(腺嘌呤、2’-脫氧腺苷、腺苷、次黃嘌呤)、氨基酸類物質(酪氨酸、L-色氨酸)、對羥基苯乙醇等可能是沙參麥冬顆粒清養肺胃、止咳祛痰的重要活性成分，為沙參麥冬顆粒治療咳嗽的研究工作提供了一定的依據。

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　　臨床醫學論文投稿刊物：《中藥與臨床》(雙月刊)創刊于2010年，是由成都中醫藥大學主辦的綜合性藥學學術刊物，特點是藥物密切聯系臨床。由多位知名教授任本刊學術指導委員會委員。