摘要煙草中多酚類物質的種類及含量對烤后煙葉的香氣品質、煙葉色澤及香吃味有重要影響，有效提取分離與確定煙草中的多酚類物質可提高烤后煙葉的品質，增加煙草制品的經濟利用價值。本文詳細介紹了溶劑萃取、超聲輔助提取、微波輔助提取和超臨界流體萃取四種提取煙草多酚的常用方法，以及高效液相色譜法(HPLC)、高效液相色譜-串聯質譜法(HPLC-MS/MS)和近紅外光譜法三種測定煙草多酚的分析方法，綜述了提取分離及分析煙草多酚新技術的研究現狀，同時對各方法的優缺點進行比較，并探討了當前亟待解決的問題及工業化利用前景，使煙草多酚能更廣泛地應用于食用、藥用等領域，增加煙草多酚的實際應用價值。

　　關鍵詞煙草多酚類物質提取分離分析檢測

　　煙草作為我國重要的工業性原料作物，對我國農產品財政收入貢獻較大[1]。據資料報道，煙草中所能測出的化合物約有300多種[2]，其中多酚類物質能達煙葉干重的0.5%～6%[1]，含量較為豐富，對煙葉以及煙草制品燃吸后產生的煙氣進行檢測，已檢測到的多酚可達280多種[3]。煙草中占比最多的三種多酚為綠原酸、蕓香苷和莨菪亭[4]，其中綠原酸含量可達煙草總多酚含量的75%～95%[5]。煙草中多酚類物質的種類及含量對煙葉色澤、卷煙香氣、卷煙吸味有著重要影響，是評估煙草制品的重要品質標準[6～8]。

　　所以，有效提取分離與研究煙草中的多酚類物質，并將其應用到食品、醫藥保健等領域，不僅能提高煙草相關產品的品質標準，還能增加煙草制品的經濟利用價值。多酚是一類植物次生代謝物質，屬于植物單寧類，含有多個酚羥基結構，在植物的葉片中最為常見[9]。植物多酚能使機體內自由基得到有效清除，機體衰老進程得以緩解[10]，心腦血管等慢性疾病得到有效預防[11]，能抵抗神經性疾病[12]，降低癌癥風險[13]等，因此在營養食品、醫藥保健等領域常被用作抗氧化劑、抑菌劑、防腐劑等。本文主要綜述了煙草中多酚類物質的有效提取分離與檢測方法，介紹了國內外關于煙草多酚的研究現狀，以期為煙草多酚的后續獲取利用和工業化生產提供參考。

　　1煙草中多酚的提取分離技術

　　1.1有機溶劑提取法

　　溶劑萃取的關鍵在于要根據相似相溶性特征選擇與煙草中待提取活性成分的性質相對應的溶劑。多酚類物質中含有酚羥基極性基團，選擇針對其溶解度較好的甲醇、丙酮作溶劑效果較好[14]。為防止多酚分子發生醇解反應，通常選用丙酮-水體系為溶劑，所提多酚多為倍酸酯多酚;若選用弱酸性醇-水體系為溶劑，所提物質多為單寧類多酚。pH在酸性范圍時，多酚大多以分子形式存在于植物體中，pH在堿性范圍時，則多數為負離子狀態，因此，可調節萃取劑的pH選擇性萃 取不同組分。

　　此外，可依據目標多酚的分子量差異選擇合適的萃取溶劑，若所提多酚分子量較低，可選用乙醚為溶劑;若所提多酚為中等分子量多酚(單寧類)，既可選用乙酸乙酯作溶劑，也可選擇丙酮水溶液作溶劑;當所提多酚分子量在1500左右時，可選用水作溶劑;而大分子量多酚在熱堿溶液中提取效果較好[15]。

　　有機溶劑萃取法操作便捷、成本低、溶劑易回收、工業放大容易，但萃取物中往往含有多種化學性質相似的成分，導致有效成分含量較低，且提取效率不高、耗時較長、溶劑殘留較多，所以，通常采用溶劑提取法對煙葉中的化學成分進行粗提，之后再根據需要對粗品進行純化。由于煙草制品主要為吸食性消費品，選擇溶劑時必須考慮對人體健康的影響，綠色、無毒、無污染的乙醇-水體系常常成為首選提取劑。

　　1.2超聲輔助提取法

　　超聲波具有強空化作用，會產生高速微射流及強剪切力，促使物質破壁而出，能增強植物成分溶出的速率，常常輔助于溶劑提取法。超聲波輔助提取法可加速萃取時間，所需溫度較低，萃取效率高，能極大地降低溶劑的使用體積和成本[16]， 較常見于提取植物中的天然活性成分。陳森林等采用響應面Box-Behnken中心組合研究優化超聲輔助提取煙葉多酚的工藝，確定最終提取溶劑為40%～80%乙醇水溶液，料液比10～30mL/g，在50℃條件下50W提取30～45min，所得萃取物含8種多酚類致香前體物質(綠原酸、莨菪亭、咖啡酸、香豆素、蕓香苷、新綠原酸、莰菲醇-3-0-蕓香糖苷、隱綠原酸)，每克煙葉中的總多酚含量可達44.28mg[17，18]。

　　Gu等[19]研究了一種動態超聲輔助提取干煙葉中多酚的方法，以甲醇(含0.5%抗壞血酸)為溶劑，超聲振動頻率為35kHz，35℃下用6mL溶劑(流量0.5mL/min)萃取10min，所得提取物中含綠原酸、艾蒿素、蘆丁、東莨菪素和槲皮素等5種多酚。與靜態超聲輔助提取法相比，提取多酚所需時間從30min縮短為10min，回收率由85%顯著提高到96%，所提取5種多酚的總含量由2.150mg/g增加為2.225mg/g，且溶劑消耗也大大減少，說明動態超聲輔助提取明顯優于靜態超聲輔助提取。由于超聲波衰減因素的存在，會導致大直徑提取罐周壁形成一個無空化效應的超聲空白區域，僅使一環形空間可得到超聲的有效影響;另外，較高的設備成本以及設備易損性也制約了超聲波輔助在實際工業生產過程中的應用。

　　1.3微波輔助提取法

　　微波與物料的相互作用及其強度取決于物料的介電特性，微波穿透低介電損耗物料時，微波能吸收較低;穿透高介電損耗物料時吸收的微波能呈先增后減趨勢;穿透非介電損耗物料時幾乎不吸收微波能。因此，介電特性與物料的化學成分有較大相關性，微波輔助適應的場所需與物料的介電特性匹配。微波輔助溶劑萃取的本質在于微波強化了傳熱傳質作用，避免了熱對流、熱傳導和熱輻射等方式中的能量損失，使物料加熱更快、更均勻，從而強化傳質過程，有利于物質的溶出。某些場合，微波萃取過程中產生的高壓允許溶劑在超過常壓沸點的溫度下仍處于液體狀態[20]，對溶解過程十分有利。關于微波輔助提取天然產物中化學成分已有系列研究報道[21]。

　　王海燕等[22]以提高總多酚提取率為目標，探究出提取烤煙煙葉中綠原酸、蕓香苷的微波輔助提取條件:所用溶劑為53%甲醇(11mL/g)，560W微波輻照提取70s，每克煙葉中所提總多酚量可達22.38mg。Chen等[23]通過微波輔助提取煙草多酚，若溫度達到120℃或更高，萃取時間可短至6min，并能萃取出更多的熱降解成分。已有報道表明，微波輔助萃取法提取時間較短、溶劑需求較少、效率高、能耗低，但由于物料的不均勻性，不能使所有物料接收到同等微波輻照，整個體系受熱不均，從而導致物料的部分區域提取不充分，工藝放大難;當提取溶液為有機溶劑時，防爆問題更為凸顯，整個實驗過程安全性和不穩定性因素較多。至今，微波輔助提取煙草多酚還僅限于實驗室階段。

　　1.4超臨界流體萃取法

　　超臨界流體萃取技術(Supercriticalfluidextraction，SFE)可將有效成分的提取和分離結合于一體，依據超臨界流體在其臨界壓力及臨界溫度以上對天然產物中的低沸點或熱敏性有效成分具有較強溶解能力進行分離[24]。楊菁等[26]采用GC-MS檢測了超臨界流體萃取的煙梗中的成分，主要分為五類致香成分:美拉德及焦糖化反應相關中性化合物、堿性化合物、酚類物質、酸類和煙草本香類物質，其中酚類物質主要為4-乙烯基愈創木酚。

　　并且隨溫度逐漸升高，一些碳水化合物會發生焦糖化反應，生成小分子有機酸、羰基化合物和呋喃類等揮發性產物。趙卉[27]探索的超臨界CO2萃取煙葉中茄尼醇的優化工藝條件為:以95%乙醇作夾帶劑，在萃取壓力20MPa、溫度45℃、分離壓力5MPa、溫度35℃、CO2流量4.8L/h條件下萃取3h，茄尼醇的提取率達94.0%，提取物中茄尼醇的含量達33.0%。超臨界萃取技術已被廣泛應用于煙草加工業中，主要用于提取茄尼醇和尼古丁等化合物，以及萃取煙草中的低沸點多酚及其轉化產物。

　　1.5其他新技術

　　近年來，除了上述煙草多酚的常用提取方法，一些新技術如加壓液相萃取法、深共熔溶劑萃取法、酶輔助提取法及電滲析提取法等逐漸應用于煙草多酚的提取實驗中。

　　2煙草中多酚的分析檢測方法

　　多酚物質的定性定量以及結構分析對于煙草多酚的功能活性評價至關重要，由此，確定一種高靈敏度和高選擇性的多酚分析方法至關重要，研究人員也不斷開發出新方法新技術用于多酚成分的分析。目前較常使用高效液相色譜(HPLC)法測定單體酚，利用HPLC-串聯質譜法鑒別與分析新化合物，以及采用近紅外光譜法測定煙草中的多酚總量。

　　3結語

　　一直以來，社會各界都在關注煙草制品的安全性問題，煙草制品的品質及安全性取決于煙草中多酚類物質的種類及含量差異，所以，國內外學者也致力于煙草中多酚類物質的提取分離與分析研究，這對煙草制品的降焦減害也具有重要意義。

　　煙草論文范例： 煙草商業企業創新發展建設方案研討

　　目前，關于提取煙草多酚的方法已有許多報道，但所提取多酚含量偏低，不利于直接應用;而針對其他干擾物質較多的情況，主要采用固相萃取技術和大孔樹脂吸附等方法進一步提高煙草多酚的純度，并將其應用到工業產品中;但要將煙草多酚更廣泛地應用于食用、藥用等領域，其純化技術，尤其可工業化的純化工藝是當前亟待研發的焦點。另外，現有檢測方法仍不能將煙草多酚全部準確檢測出，為更加全面綜合地分析煙草中的多酚物質，以實現可選擇性按需添加煙草制品中的多酚物質，增加煙草多酚的實際應用價值，還需要不斷探究前處理簡單、準確度高、能適于測定實際煙葉樣品中更多多酚的方法。

　　參考文獻

　　[1]張獻忠.廢次煙末中煙草香味物質提取、應用及生物活性.浙江大學博士學位論文，2013.

　　[2]劉振宇.廢棄煙葉中有效成分提取分離與純化.大連理工大學碩士學位論文，2017.

　　[3]高婭北，段史江，付宗仁，等.安徽農業科學，2018，46(7):38～40.

　　[4]楊銀菊.打頂誘導煙葉綠原酸生物合成積累的生理機制.中國農業科學院碩士學位論文，2018.

　　[5]王晉，黃海濤，劉欣，等.煙草科技，2018，51(11):66～ 72.

　　[6]宋洋洋，張小全，楊鐵釗，等.西北植物學報，2014，34(12):2459～2466.

　　[7]王愛華.烤煙生長和調制過程中主要多酚類物質代謝動態的研究.河南農業大學碩士學位論文，2005.

　　[8]劉靜，侯英，楊蕾，等.化學研究與應用，2011，23(1):63～65.

　　[9]李合生.現代植物生理學.第二版.北京:高等教育出版社，2006.

　　作者：張花1顧麗莉1黃智華2*張尉1杜康1姚雯1彭健