【摘要】目的研究黃精對(duì)運(yùn)動(dòng)小鼠增強(qiáng)免疫力和緩解體力疲勞作用。方法采用小鼠灌胃，進(jìn)行黃精增強(qiáng)免疫力和緩解體力疲勞試驗(yàn)。結(jié)果增強(qiáng)免疫力試驗(yàn)中，中、高劑量組能提高小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)(P<0.01)，高劑量組能提高小鼠血清溶血素試驗(yàn)中抗體積數(shù)(P<0.05)，中、高劑量組能提高碳廓清能力和巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞能力(P<0.05);緩解體力疲勞功能試驗(yàn)中高劑量組(1.5g/kg)能顯著延長(zhǎng)小鼠的力竭游泳時(shí)間(P<0.05)，顯著增加肝糖原儲(chǔ)備(P<0.05);中(0.5g/kg·bw)、高劑量組(1.5g/kg·bw)能顯著降低小鼠血清尿素含量(P<0.05，P<0.01)，顯著減少血乳酸曲線下面積(P<0.05，P<0.01)。表明黃精具有緩解體力疲勞作用。結(jié)論黃精具有增強(qiáng)免疫力和緩解體力疲勞功能。

　　關(guān)鍵詞：黃精;體力疲勞;免疫

　　黃精(Polygonatumsibiricum)藥用歷史悠久，是常用的藥食同源植物。距今已有2000多年歷史，中醫(yī)古方黃精地黃丸、二精丸等至今仍在應(yīng)用。《神農(nóng)本草經(jīng)》中記載:“黃精，味甘、平、無(wú)毒，主補(bǔ)中益氣，除風(fēng)濕，安五臟，久服輕身，延年不饑”。現(xiàn)代研究表明，黃精中含有多糖、黃酮、低聚糖、生物堿、甾體皂苷、氨基酸等多種化學(xué)成分[1]，具有降血糖、抗氧化、增強(qiáng)免疫力、抗菌抗炎等多種藥理作用[2-5]。黃精也是保健食品原料，黃精作為藥食同源物品正被廣泛用于保健食品的開(kāi)發(fā)中，截止目前，以黃精為主要原料申報(bào)的保健食品1000多種，申報(bào)的保健功能主要集中在增強(qiáng)免疫力、緩解體力疲勞、輔助降血糖等。隨著黃精經(jīng)濟(jì)價(jià)值和社會(huì)效益日漸突出，在保健食品領(lǐng)域有著巨大的開(kāi)發(fā)潛力和廣闊的市場(chǎng)前景。

　　本試驗(yàn)采用小鼠灌胃給藥，設(shè)三個(gè)劑量組和陰性對(duì)照組，進(jìn)行了黃精的增強(qiáng)免疫力和緩解體力疲勞試驗(yàn)，為開(kāi)發(fā)具有增強(qiáng)免疫力和緩解體力疲勞功能的黃精類產(chǎn)品提供理論依據(jù)。

　　1儀器與材料

　　1.1動(dòng)物SPF級(jí)昆明種小鼠，雄性，飼養(yǎng)環(huán)境為屏障級(jí)。

　　1.2受試物取一定量的藥材，10倍量水煎煮3次，每次2h，合并三次濾液濃縮成所需濃度。

　　1.3儀器與試劑動(dòng)物天平、電子天平、鉛皮、電動(dòng)玻璃勻漿器、低速離心機(jī)、分光光度計(jì)、游泳箱、恒溫水浴鍋、玻璃器皿、一次性定量取血管、試管、離心管、微量加樣器、手術(shù)器械。測(cè)定尿素、肝糖原和血乳酸的試劑盒均由南京建成生物公司提供。紫外分光光度計(jì)、酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀、光學(xué)顯微鏡、血細(xì)胞計(jì)數(shù)器、24孔和96孔平底細(xì)胞培養(yǎng)板、96孔U型底細(xì)胞培養(yǎng)板。

　　1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以(x±s)表示。對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行完全隨機(jī)設(shè)計(jì)單因素方差分析(不符合應(yīng)用條件時(shí)需進(jìn)行數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換)，進(jìn)一步兩兩比較采用LSD-t法。Pdddddd<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

　　2方法

　　2.1增強(qiáng)免疫力試驗(yàn)[6]免疫功能檢測(cè)實(shí)驗(yàn)選取雄性小鼠200只，分為4個(gè)免疫大組，每免疫大組又分為水對(duì)照組、低、中、高劑量組，每組各10只。免疫一組用于遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)(DTH)實(shí)驗(yàn)、血清溶血素測(cè)定、抗體生成細(xì)胞數(shù)測(cè)定;免疫二組用于小鼠碳廓清實(shí)驗(yàn);免疫三組用于小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞實(shí)驗(yàn);免疫四組用于小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)和小鼠NK細(xì)胞活性測(cè)定。實(shí)驗(yàn)環(huán)境溫度22℃±2℃，相對(duì)濕度50%±10%。

　　高、中、低劑量組給藥劑量分別為生藥1.5g/kg、0.5g/kg、0.25g/kg(分別相當(dāng)于人體推薦劑量的30、10和5倍)，對(duì)照組給予等體積純化水。各組灌胃給藥，每日1次，連續(xù)30d，灌胃體積均為0.1mL/10g體重。連續(xù)灌胃30d后測(cè)各項(xiàng)指標(biāo)，包括細(xì)胞免疫功能指標(biāo)、體液免疫功能指標(biāo)、單核-巨噬細(xì)胞吞噬指標(biāo)及NK細(xì)胞活性測(cè)定。

　　2.2緩解體力疲勞試驗(yàn)選取檢疫合格小鼠160只，將小鼠隨機(jī)分為4大組，按體重隨機(jī)分為陰性對(duì)照組和高、中、低劑量組，每組10只小鼠。高、中、低劑量同增強(qiáng)免疫力試驗(yàn)，經(jīng)口每日一次灌胃給予小鼠受試物，灌胃體積按20mL/kg.bw，陰性對(duì)照組以等體積的純化水代替受試物溶液灌胃，連續(xù)給予30d后測(cè)定緩解體力疲勞功能的各項(xiàng)指標(biāo)。包括負(fù)重游泳時(shí)間、血清尿素、肝糖原、血乳酸。

　　3結(jié)果

　　3.1增強(qiáng)免疫力試驗(yàn)

　　3.1.1對(duì)小鼠體重、臟器體重比值的影響

　　小鼠初始體重、灌胃30天后體重增長(zhǎng)值均數(shù)在各組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。小鼠脾臟體重比值均數(shù)和胸腺體重比值均數(shù)在各組間比較，差異亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

　　3.1.2各劑量組小鼠細(xì)胞免疫功能指標(biāo)比較

　　小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)結(jié)果顯示，中、高劑量組小鼠足跖腫脹度顯著高于對(duì)照組(P<0.01)，表明受試物可提高小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)能力。

　　ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，各組間的淋巴細(xì)胞增殖能力均數(shù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。表明受試物對(duì)小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力無(wú)影響。見(jiàn)表2。

　　3.1.3各劑量組小鼠體液免疫功能指標(biāo)比較

　　小鼠抗體生成細(xì)胞數(shù)測(cè)定表明各組間抗體生成細(xì)胞數(shù)均數(shù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。小鼠血清溶血素實(shí)驗(yàn)中，高劑量組與對(duì)照組間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

　　3.1.4小鼠單核巨噬細(xì)胞吞噬功能影響采用小鼠單核-巨噬細(xì)胞碳廓清能力測(cè)定實(shí)驗(yàn)和小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞能力測(cè)定實(shí)驗(yàn)。前者中、高劑量組吞噬指數(shù)1與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);后者中、高劑量組吞噬指數(shù)2、吞噬率平方根反正弦轉(zhuǎn)換值與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

　　3.1.5小鼠NK細(xì)胞活性改變各組間小鼠NK細(xì)胞活性差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。表明受試物對(duì)小鼠NK細(xì)胞活性無(wú)影響。

　　3.2抗疲勞試驗(yàn)

　　3.2.1各組動(dòng)物的體重在試驗(yàn)前實(shí)驗(yàn)中及結(jié)束時(shí)均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。表明對(duì)小鼠體重?zé)o不良影響。

　　3.2.2小鼠5%負(fù)重游泳試驗(yàn)與陰性對(duì)照組比較，高劑量組小鼠負(fù)重游泳時(shí)間顯著性延長(zhǎng)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

　　3.2.3小鼠力竭運(yùn)動(dòng)后血清中尿素/肝糖原測(cè)定試驗(yàn)

　　中、高劑量組小鼠血清尿素含量顯著性低于對(duì)照組(P<0.05，P<0.01);高劑量組小鼠肝糖原含量顯著性高于對(duì)照組(P<0.05)。

　　3.2.4小鼠力竭運(yùn)動(dòng)后血乳酸的影響測(cè)定試驗(yàn)

　　經(jīng)口給予小鼠不同劑量樣品后，游泳前、游泳后休息0min、休息20min時(shí)各組小鼠血乳酸含量均無(wú)顯著性差異(P>0.05)。中、高劑量組小鼠三個(gè)時(shí)間點(diǎn)血乳酸曲線下面積與對(duì)照組比有顯著性差異(P<0.05，P<0.01)。

　　4討論

　　隨著社會(huì)節(jié)奏的加快，社會(huì)競(jìng)爭(zhēng)日益激烈，免疫低下及疲勞已成為威脅人類健康的重要因素。因此具有增強(qiáng)免疫力及緩解體力疲勞的保健食品具有很好的市場(chǎng)前景。黃精作為藥食同源中藥之一，有悠久的食用歷史，在中國(guó)應(yīng)用已有千年歷史，被道家譽(yù)為養(yǎng)生圣藥，常用來(lái)延年益壽，療諸病。本研究依據(jù)衛(wèi)生部《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》2003年版中緩解體力疲勞及增強(qiáng)免疫力試驗(yàn)方法，選用小鼠進(jìn)行試驗(yàn)，研究了黃精的增強(qiáng)免疫力和緩解體力疲勞作用。

　　經(jīng)口灌胃給予小鼠0.25、0.5、1.5g/kg·bw劑量的黃精30d后，與對(duì)照組比較，中、高劑量組能提高小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng);高劑量組能提高小鼠血清溶血素實(shí)驗(yàn)值抗體積數(shù);中、高劑量組能提高碳廓清能力和巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞能力(P<0.05);對(duì)小鼠體重增長(zhǎng)、胸腺/體重比值、脾臟/體重比值無(wú)影響;對(duì)ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化、小鼠抗體生成、小鼠NK細(xì)胞活性均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。根據(jù)《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》(2003年版)中增強(qiáng)免疫力功能的判斷標(biāo)準(zhǔn)，本實(shí)驗(yàn)中細(xì)胞免疫功能和單核巨噬細(xì)胞功能結(jié)果均為陽(yáng)性，表明黃精具有增強(qiáng)免疫力的功能。

　　經(jīng)過(guò)30d連續(xù)灌胃黃精，高劑量組(1.5g/kg)能顯著延長(zhǎng)小鼠的力竭游泳時(shí)間(P<0.05)，顯著增加肝糖原儲(chǔ)備(P<0.05);中(0.5g/kg·bw)、高劑量組(1.5g/kg·bw)能顯著降低小鼠血清尿素含量(P<0.05，P<0.01)，顯著減少血乳酸曲線下面積(P<0.05，P<0.01)。表明黃精具有緩解體力疲勞作用。

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　　作者：張新日，李國(guó)良，宋一凡，張夢(mèng)欣

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